His‑Cys‑Lys‑Phe‑Trp‑Trp；HIV 整合酶抑制多肽|科技 |His |Trp |序列 |病毒 |整合

His‑Cys‑Lys‑Phe‑Trp‑Trp；HIV 整合酶抑制多肽 ypxx.net

His-Cys-Lys-Phe-Trp-Trp 是人类免疫缺陷病毒 (HIV) 整合酶的抑制剂，IC50 为 2 μM。

基本信息

英文名称：HIV Integrase Inhibitor Peptide，His‑Cys‑Lys‑Phe‑Trp‑Trp
中文名称：HIV 整合酶抑制多肽，人免疫缺陷病毒 1 型整合酶抑制六肽
氨基酸全序列：His‑Cys‑Lys‑Phe‑Trp‑Trp
单字母序列：HCKFWW
三字母序列：His‑Cys‑Lys‑Phe‑Trp‑Trp
分子量：906.06
分子式：C₄₆H₅₅N₁₁O₇S
CAS 号：172546‑75‑7
等电点：理论 pI 约 9.47，属于碱性多肽，序列含组氨酸、赖氨酸两个碱性残基，无强酸性侧链氨基酸，生理 pH 条件下携带净正电荷。该多肽为人工固相合成的六肽，是针对 HIV‑1 整合酶的多肽类抑制剂，N 端与 C 端均为游离末端，无乙酰化、酰胺化等化学修饰。

结构信息

该多肽为线性六肽，仅含 1 个半胱氨酸残基，无链内二硫键；N 端为游离组氨酸氨基，C 端为游离色氨酸羧基，两端均无化学修饰。

序列中包含两个连续色氨酸残基与一个苯丙氨酸残基，疏水芳香侧链占比高，是与靶蛋白结合的主要疏水作用位点；赖氨酸侧链提供正电荷，介导与整合酶表面酸性区域的静电相互作用；半胱氨酸侧链巯基可参与氢键形成，同时易发生氧化生成二硫键，形成多肽二聚体。

水溶液环境下，多肽因疏水残基堆积呈现一定构象倾向，整体以柔性无规卷曲为主，不存在稳定的 α‑螺旋或 β‑折叠二级结构；结合 HIV 整合酶活性位点时，肽链发生构象重排，适配蛋白结合口袋。

多肽两端均为游离末端，对氨基肽酶、羧基肽酶敏感，在血清、细胞裂解液等含蛋白酶体系中易被降解；半胱氨酸巯基暴露于空气时易氧化失活，整体化学稳定性弱于末端封闭的合成多肽。

作用机理

该多肽是 HIV‑1 整合酶的竞争性抑制剂，体外对整合酶的抑制活性 IC₅₀约为 2 μM。HIV 整合酶是病毒复制周期的关键酶，负责完成病毒 cDNA 的 3' 端加工与链转移两步核心反应，将病毒基因组共价整合入宿主细胞染色体。

多肽通过结合整合酶的催化核心结构域，竞争性占据整合酶与病毒 DNA 的结合界面，阻碍病毒 DNA 末端与整合酶活性位点的结合，同时干扰整合酶的金属离子配位环境，从而同时抑制 3' 加工反应与链转移反应，阻断病毒 DNA 整合到宿主基因组的过程，终止病毒复制周期。

多肽的芳香族残基嵌入整合酶的疏水结合口袋，提供疏水堆积与 π‑π 相互作用；碱性赖氨酸侧链与整合酶表面酸性氨基酸残基形成静电相互作用，共同维持结合亲和力。该多肽特异性作用于整合酶，对 HIV 逆转录酶、蛋白酶无明显抑制活性。多肽被蛋白酶水解后，完整结合表位被破坏，丧失抑制活性；半胱氨酸氧化形成二聚体后，抑制活性也会显著下降。

研究进展

该多肽最早通过噬菌体展示多肽文库筛选获得，是早期被鉴定的 HIV 整合酶多肽类抑制剂之一。早期生化实验验证其可同时抑制整合酶介导的 3' 加工与链转移反应，在微摩尔浓度下即可发挥阻断效应，为解析整合酶的催化机制提供了工具分子。

后续研究将其作为模式抑制剂，用于探究整合酶与 DNA 的结合模式、催化活性位点的结构特征，以及整合酶抑制剂的构效关系。受限于多肽本身的固有缺陷 —— 细胞膜穿透能力弱、体内易被蛋白酶快速降解、口服生物利用度极低，该分子未进入药物开发流程，未开展动物体内药效与临床研究。

除抗病毒研究外，因分子含半胱氨酸巯基，该多肽也被部分研究用作巯基化合物模型，用于自由基清除反应动力学的体外测试，但这一应用并非其核心研究方向。目前该多肽主要作为经典的整合酶多肽抑制剂，用于体外生化水平的整合酶功能与抑制剂筛选研究。

溶解保存

溶解：多肽含较多疏水芳香残基，水溶性中等。可先用少量二甲基亚砜助溶，再用纯水、PBS 缓冲液或 Tris‑HCl 缓冲液梯度稀释至工作浓度；也可使用稀醋酸水溶液直接溶解。操作过程尽量减少暴露于空气，避免加入氧化剂，防止半胱氨酸巯基氧化形成二聚体；避免强碱、高温条件，防止肽键水解断裂。
保存：冻干粉末密封、避光条件下‑20℃干燥长期保存，充氮隔绝氧气可进一步提升稳定性；水溶液分装为小份后‑20℃或者‑80℃冻存，严格避免反复冻融。因巯基易氧化，水溶液状态下稳定性差，建议现配现用；接触蛋白酶的生物样本体系必须临用前配制。