JF 669 NHS Ester
一、核心参数速览
中文名称：Janelia Fluor 669 琥珀酰亚胺酯、 JF 669 活性酯
英文名称：Janelia Fluor 669, SE、JF669, NHS、JF 669 NHS Ester
CAS 号：2127150-20-1
分子式：C₃₄H₃₀F₃N₃O₆SSi
分子量：693.77
外观：浅绿至绿色固体
溶解性方面：DMSO 中可溶至 20 mM
储存条件：粉末 -20℃ 可存 3 年，4℃ 可存 2 年；溶液 -80℃ 6 个月，-20℃ 1 个月，全程避光。
厂商：西安强化生物科技
二、概念解析：它和 IR 650 NHS Ester 有什么不同？
JF 669 NHS Ester 与 IR 650 NHS Ester 的反应端完全一致：NHS 酯在弱碱性条件下与伯胺形成酰胺键。核心差异在染料的设计取向。
IR 650 的核心卖点是高消光系数（约 230,000 M⁻¹cm⁻¹）和高标记比下的抗自淬灭能力，适合低丰度靶标的信号放大。JF 669 的消光系数较低（约 116,000），但它的设计重点在光稳定性和超分辨兼容性。30 次漂白循环后保留 97% 荧光这一指标，直接对应 dSTORM 和 STED 中反复激发、长时间采集的需求。此外，JF 669 明确标注具有细胞通透性，适合活细胞成像，而许多常规 NHS 酯染料在这一维度上并未做专门优化。
另一个值得注意的功能扩展是：JF 669 NHS Ester 可以转化为 HaloTag 或 SNAP-tag 自标记标签系统的底物。这意味着它不仅能直接标记抗体或蛋白的伯胺，还能通过自标记标签实现更可控的细胞内定位和标记密度调节。对于需要在活细胞中追踪特定融合蛋白的实验，这条路径提供了比随机胺标记更高的特异性。
三、实验中的常见问题
Q1：NHS 酯端偶联氨基的条件是什么？
与所有 NHS 酯试剂一致：推荐 pH 7.2-8.5 的无胺缓冲液，PBS 或 HEPES 均可。缓冲液中不能含 Tris、甘氨酸等伯胺，它们会竞争性消耗 NHS 酯。典型操作：将蛋白溶于缓冲液，新鲜配制 JF 669 NHS Ester 的 DMSO 母液（可配至 20 mM），按适当摩尔比加入，室温反应 30-60 分钟或 4℃ 反应 2 小时，全程避光。反应结束后通过透析、脱盐柱或超滤去除游离染料。
Q2：为什么选 JF 669 而不是普通 Cy5 或 IR 650？
如果你的实验涉及超分辨显微镜（dSTORM、STED），JF 669 的光稳定性数据是直接相关的性能指标。如果实验需要活细胞成像，JF 669 的细胞通透性标注提供了额外的便利。如果只是常规固定样品标记、对光漂白不敏感，普通 Cy5 或 IR 650 的成本可能更低。选择取决于实验对“反复激发耐受性”和“活细胞兼容性”的实际需求。
Q3：溶解性不好怎么办？
DMSO 中可溶至 20 mM，这是配制母液的推荐溶剂。不建议直接用水溶解固体，NHS 酯在水溶液中会逐渐水解。母液应现配现用，不宜长期存放。从冰箱取出后等包装恢复室温再打开，防止冷凝水导致 NHS 水解。若溶解困难，可在 37℃ 温育并超声辅助。
Q4：保存要注意什么？
-20℃ 避光干燥保存。粉末状态稳定期较长，溶液状态显著缩短（-80℃ 6 个月，-20℃ 仅 1 个月）。JF 669 对光敏感，操作全程建议避光。NHS 酯对湿气敏感，分装后充入惰性气体保存可延长稳定性。降解标志包括溶液颜色变浅或荧光强度下降。
四、相关试剂参考
Janelia Fluor 669, Azide
Janelia Fluor 669, Alkyne
Janelia Fluor 669, Maleimide
Janelia Fluor 669, HaloTag ligand
Janelia Fluor 669, SNAP-tag ligand
Janelia Fluor 635, SE
Janelia Fluor 646, SE
Janelia Fluor 549, SE
IR 650 NHS Ester
Cy5 NHS Ester
Alexa Fluor 660 NHS Ester
Atto 655 NHS Ester
CF660R NHS Ester
DSPE-PEG-NHS
※ 温馨提示
该试剂为基础科研专用试剂，不可用于临床诊断或治疗。本文档由西安强化生物科技有限公司XAJ整理，数据仅供参考。
