Agarose-NPL,Agarose-Narcissus Pseudonarcissus Lectin,Agarose-水仙凝集素;Agarose-NPL水仙凝集素 亲和层析分离要点(agarose和agar的区别) ypxx.net

由陕西新研博美生物科技整理提供

Q1:该试剂基础信息是什么?

Agarose-NPL是将水仙假水仙凝集素(NPL)通过化学偶联法固定于琼脂糖微珠表面的亲和层析介质,核心识别基团为Galβ1→4GlcNAc,专用于含该糖链结构的糖蛋白、糖脂及糖核酸的亲和富集与分离纯化。

英文名:Agarose-NPL / Agarose-Narcissus Pseudonarcissus Lectin / Agarose-NAI

中文名:Agarose-水仙凝集素 / 琼脂糖偶联水仙假水仙凝集素 / 琼脂糖-NPL

纯度:95%

保存方式:-20℃干燥避光密封存放

实验室:陕西新研博美生物科技

Q2:该试剂具备哪些独特理化优势?

琼脂糖基质为介孔多孔结构,比表面积大,蛋白负载量可达每g湿珠8-12mg;偶联后珠径均一(90-120μm),大分子糖蛋白(>150kDa)仍可扩散进入珠内活性位点,柱层析时洗脱峰对称、拖尾少

NPL凝集素对Galβ1→4GlcNAc二糖结构域识别亲和常数约10⁵ M⁻¹,结合后仅需0.2M Gal或0.2M GlcNAc竞争性洗脱即可解离,条件温和,目标蛋白构象完整性保护好

Q3:实验室里可以用在哪些实验中?

血清糖蛋白分馏:从胎牛血清、人血清中利用Agarose-NPL亲和柱分离含糖基的糖蛋白组分(如糖脂蛋白、糖苷蛋白),应用于糖生物学及糖链构象解析研究

膜糖脂纯化:对细胞膜糖脂提取物(如神经节苷脂、鞘糖脂混合物)进行亲和层析,分离特定糖链构型的糖脂分子,辅助糖脂组学及膜生物物理分析

Q4:日常取用、配制试剂有哪些需要留意的地方?

Agarose-NPL为冻存态试剂,-20℃取用后先于4℃平衡30min再开瓶操作,避免反复冻融造成琼脂糖骨架塌陷及偶联凝集素构象失活;单次取用后原瓶密封放回-20℃

上柱前用低离子强度缓冲液(50mM Tris-HCl pH 7.4,含150mM NaCl)充分洗涤珠体,残余盐分偏高会直接干扰后续洗脱分辨率;配柱时流速控制在1-5 mL/min,避免高压导致柱床塌陷

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