
Cy5 标记转铁蛋白,Cy5-Transferrin,CAS 无专属编号,是以转铁蛋白为蛋白骨架,共价接枝 Cy5 近红外荧光基团制备而成的荧光标记蛋白试剂,依托转铁蛋白特异性结合特性以及 Cy5 长波长荧光信号,用于体外蛋白结合实验、荧光成像示踪以及光谱表征研究,是靶向蛋白研究中常用的荧光探针原料。
中文名称:Cy5 标记转铁蛋白
英文名称:Cy5-Transferrin
CAS:无专属编号
分子量:约 77 kDa(转铁蛋白本体),接枝 Cy5 荧光基团后总分子量小幅上升
PEG 分段分子量:无 PEG 链段
分子式:蛋白 - 荧光染料复合物,无固定小分子分子式
外观:蓝紫色冻干粉末
纯度:蛋白纯度≥90%,染料标记比(F/P)控制在 1.0–3.0
规格包装:100μg、500μg、1mg
结构特点:以转铁蛋白天然球状多肽链为骨架,蛋白表面赖氨酸残基侧链伯氨基与 Cy5 活性染料发生酰胺化连接,荧光基团分散结合在蛋白表面,标记过程保留转铁蛋白固有的铁离子结合能力。
产地:西安齐岳生物可提供
包装:mg以及g级
纯度标准:≥95%(高纯级)

该标记蛋白独有的特性来自转铁蛋白自身的结合功能与 Cy5 近红外荧光的搭配。转铁蛋白是球状糖蛋白,具备可逆结合铁离子的能力,可识别对应的受体,在合适条件下维持蛋白构象稳定;Cy5 属于花菁类近红外染料,激发波长约 646 nm,发射波长约 662 nm,荧光信号处于长波长区间,远离很多基质的自发荧光区域,能够降低背景干扰。染料依靠稳定酰胺键和蛋白共价结合,不易在常规缓冲条件下脱离,荧光基团随转铁蛋白分子同步迁移;标记比例可控,可根据实验对信号强弱的需求进行选择。标记位点分布在蛋白表面氨基区域,对蛋白核心结合口袋扰动较小,标记后的转铁蛋白依旧保持铁结合活性,荧光信号可以直接对应转铁蛋白的分布与结合状态。
从分子构建逻辑与反应机制来看,Cy5-NHS 活性酯在弱碱性缓冲环境下,与转铁蛋白赖氨酸残基上的伯氨基发生亲核取代反应,脱去 NHS 离去基团,形成酰胺键,将 Cy5 共轭发色团锚定在蛋白表面。Cy5 染料的共轭体系较长,荧光穿透性较好,光散射干扰相对更低;在未发生结合时,标记蛋白以单体形式分散在水相体系;当体系内存在可结合的配体或者受体底物时,转铁蛋白可以发生特异性相互作用,荧光信号随之发生位置或者环境依赖性变化。染料和蛋白之间不存在明显的自发淬灭作用,荧光信号变化主要来源于蛋白所处微环境改变或者结合行为,蛋白的结合功能和荧光信号读取相互独立,既可以先完成孵育结合再采集荧光图像,也可以实时监测结合动力学过程。
应用场景集中在体外生化与荧光表征实验:开展荧光成像观测,追踪转铁蛋白和对应底物之间的相互作用;用于荧光凝胶电泳示踪,监测转铁蛋白单体以及结合复合物的迁移行为;利用荧光偏振、荧光光谱等手段,定量分析转铁蛋白的结合亲和力;作为近红外荧光报告分子,搭建体外蛋白相互作用体系;用于铁离子结合相关的体外生化实验,借助荧光信号反映转铁蛋白的状态变化;适配共聚焦荧光检测,获取蛋白复合物的空间分布信息。
储存与操作方面,本品密封避光,于 - 20℃冷冻干燥条件保存,严格避免反复冻融;复溶推荐使用中性缓冲溶液,全程避光操作,减缓 Cy5 染料光漂白;不可在强变性剂、极端酸碱、高温体系中长期孵育,防止转铁蛋白构象改变、失去结合活性以及染料脱落;荧光采集时控制光照时长,减少光漂白带来的信号误差;冻干品复溶后建议避光分装短期储存,降低多次开盖带来的蛋白失稳与荧光衰减。总的来说,Cy5-Transferrin 将转铁蛋白的特异性识别结合能力与 Cy5 低背景近红外荧光信号整合在一起,在保留蛋白原有生化功能的同时赋予可视化信号,为体外转铁蛋白相关的结合分析、荧光示踪以及光谱表征工作提供稳定的标记蛋白探针
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