RB-PEG-Biotin（罗丹明-聚乙二醇-生物素） 是一种将罗丹明B荧光基团、聚乙二醇柔性连接链与生物素通过共价键串联的多功能标记试剂。该试剂在荧光标记、亲和层析及固相表面修饰等实验中有常规应用，PEG连接臂的长度直接影响分子间空间位阻与最终标记效率。
一、试剂基本信息与分子结构
1. 中文名：罗丹明PEG生物素
2. 英文名：Rhodamine B-PEG-Biotin
3. 分子量：1000
4. 规格：1 mg / 5 mg / 10 mg
5. 纯度：≥95%
6. 来源：强化生物
分子结构由三部分组成：N-端为罗丹明B异环荧光基团，中间为聚乙二醇（PEG）柔性连接链，C-端为生物素单元。PEG链的引入增大了荧光团与生物素之间的空间距离，降低分子内能量转移造成的荧光猝灭。
二、主要理化性质
该试剂在DMSO中溶解性良好，常温下呈橙红色粉末或油状液体。罗丹明B单元在pH 4–7范围内发射波长约595 nm，pH升至8以上时荧光强度明显下降。PEG链赋予分子一定的疏水-亲水平衡，使其在水相与有机相中均具有一定分散性，但高盐浓度下仍可能出现聚集。
三、常见应用场景
1. 荧光标记：利用生物素-亲和素高亲和力相互作用，将RB-PEG-Biotin交联至目标分子表面，罗丹明端提供可视荧光信号。
2. 亲和层析：作为生物素化探针与链霉亲和素柱结合，用于目的分子的捕集与分步洗脱。
3. 表面定量：将PEG-Biotin端固定于固相载体，罗丹明端朝向溶液侧，通过荧光读数评估结合量。
四、储存与操作注意事项
1. 储存：-20 °C避光密封，避免反复冻融超过3次。
2. 溶解：建议以DMSO配成1–10 mg/mL母液，分装后-20 °C保存。
3. 操作全程佩戴手套，避免手接触生物素端RB-PEG-Biotin，罗丹明PEG生物素，防止内源性生物素引入干扰。
4. 反应缓冲体系pH建议控制在6.0–7.5，碱性强于8.5会加速罗丹明环开环导致信号丢失。
1. 荧光强度偏低：优先排查缓冲液pH是否偏碱，其次检查体系中是否存在高浓度盐或金属离子引起的内滤与猝灭效应。
2. 结合效率下降：确认生物素端是否经蛋白酶处理而降解，操作前可加入适量蛋白酶抑制剂。
3. 低温下出现沉淀：短链PEG规格在4 °C溶解度有限，可将溶液回温至室温再转移至反应体系。
免责声明：本试剂仅供科研用途，不用于临床诊断、治疗或任何与人体相关的实验。使用者应遵守所在机构的安全操作规程及化学品管理相关法规，自行评估并控制操作风险。
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