AF 488 ECL,AF488标记刺桐凝集素,观察细胞迁移、内吞过程中糖链的动态分布变化(af488荧光颜色) ypxx.net

产品介绍

AF488 ECL是将从刺桐(Erythrina Cristagalli)种子中天然提取纯化的刺桐凝集素,与Alexa Fluor 488荧光染料通过成熟的NHS酯共价偶联工艺制备而成的糖链特异性绿光通道标记科研试剂。它完整保留了刺桐凝集素对半乳糖β-1,3-N-乙酰半乳糖胺及相关唾液酸化糖链的高亲和力识别特性,依托Alexa Fluor 488染料优化的磺化荧光素骨架,兼具超高水溶性、高光稳定性与接近0.92的荧光量子产率,全程严格控制偶联反应的染料-蛋白摩尔比,通过多步透析与尺寸排阻层析彻底去除未反应的游离染料,解决了传统FITC标记凝集素光漂白快、水相溶解度差、pH敏感的痛点。试剂为亮黄绿色冻干品,在中性生理缓冲液中溶解分散性优异,是全场景通用型唾液酸靶向绿光标记标杆工具。

基础参数

中文名称:AF488标记刺桐凝集素,AF488-刺桐凝集素

英文名称:AF 488 ECL,Alexa Fluor488-ECL,AF488-Erythrina Cristagalli Lectin

外观状态:亮黄绿色冻干品

荧光光谱参数:最大激发波长约495 nm,发射波长约519 nm,完全适配标准488 nm激光线与FITC/GFP通用滤光片组

用途:唾液酸化糖链绿光通道荧光标记,活细胞长时间成像,流式细胞术通用检测,高内涵筛选体系适配

作用机理

AF488 ECL中的刺桐凝集素为天然同源二聚体结构,每个亚基的碳水化合物识别结构域通过氢键与范德华力,特异性结合末端半乳糖β-1,3-N-乙酰半乳糖胺以及关联的唾液酸化糖链结构,对该类特征糖基化修饰具有高选择性。AF488荧光基团通过稳定的酰胺键锚定在ECL蛋白表面的赖氨酸残基上,标记位点远离蛋白核心糖结合口袋,偶联过程完全不影响凝集素的天然构象与糖链识别活性。在488nm波长激发下,偶联在蛋白上的AF488基团可发射出明亮的519nm绿色荧光,该光谱与几乎所有常规生物荧光设备的标准FITC通道完全兼容,无需额外调整光路即可直接获得高信噪比成像信号。

应用领域

AF488 ECL可用于活细胞长时间动态成像,依托其优异的光稳定性,在共聚焦显微镜下对活细胞表面唾液酸化糖链进行长时间连续追踪,观察细胞迁移、内吞过程中糖链的动态分布变化。该试剂可应用于高通量高内涵筛选,作为绿光通道探针在高内涵筛选系统中批量检测大量细胞样本的唾液酸化水平,快速完成药物干预后的糖基化变化表型筛选。同时它也适用于流式细胞术常规检测,作为通用绿光通道探针标记细胞群体中靶标糖链高表达亚群,配合其他通道探针完成多参数分析,为糖生物学相关非医疗方向研究提供全场景通用的稳定工具。

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