CY5.5-DHA, Cyanine5.5-DHA（花菁染料CY5.5-二十二碳六烯酸）的基础知识整理，认识简单特点与用途|科技 |acid |花菁 |荧光 |标记 |细胞膜

CY5.5-DHA, Cyanine5.5-DHA（花菁染料CY5.5-二十二碳六烯酸）的基础知识整理，认识简单特点与用途 ypxx.net

花菁染料CY5.5-二十二碳六烯酸，CY5.5-DHA，Cyanine5.5-DHA，CY5.5-docosahexaenoic acid，Cyanine5.5-docosahexaenoic acid

前言

Cy5.5-DHA是一种近红外荧光-多不饱和脂肪酸偶联型探针，专门用于生物膜脂质动力学追踪、脂质代谢示踪及细胞膜结构研究。其核心结构由花菁染料Cy5.5与二十二碳六烯酸（DHA）通过稳定的共价键偶联而成。Cy5.5提供近红外荧光信号（激发~675-680 nm，发射~695-710 nm），赋予探针深层组织穿透与低背景干扰成像能力；DHA是一种重要的Omega-3多不饱和脂肪酸（C22:6），作为细胞膜磷脂的重要组成成分，在神经发育和膜功能维持中发挥关键作用。该偶联物兼具长链不饱和脂肪酸的脂质亲和特性与Cy5.5染料的近红外光学优势，可精准嵌入生物膜脂质双分子层，为脂质可视化研究提供工具。

关键理化参数

中文名称：花菁染料CY5.5-二十二碳六烯酸、CY5.5标记DHA

英文名称：CY5.5-DHA, Cyanine5.5-DHA, Cy5.5-Docosahexaenoic Acid, Cyanine5.5-docosahexaenoic acid

外观/性状：深蓝色至蓝黑色粉末或固体

纯度：≥95%

溶解性：溶于DMSO、DMF、二氯甲烷、氯仿等有机溶剂

保存条件：-20°C避光、干燥密封保存，避免反复冻融

激发/发射波长：约675-680 nm（激发）/ 约693-707 nm（发射）

适用仪器：小动物活体成像系统、共聚焦显微镜、荧光显微镜、流式细胞仪

科研实验室：西安凯新生物

安全信息

防护措施：操作时请佩戴实验服、丁腈手套及护目镜，避免粉末吸入及皮肤接触。

操作规范：Cy5.5对光敏感，建议在暗室或低光条件下操作；仅限科研用途，不可用于人体实验。

常见问题解答 (Q&A)

Q1：该试剂适用于哪些研究领域？

答：主要应用于：①细胞膜脂质动力学追踪——DHA的疏水碳链可精准嵌入生物膜脂质双分子层，Cy5.5荧光信号可用于实时追踪细胞增殖、迁移过程中膜脂质的分布、翻转与转运规律，解析膜流动性与通透性的调控机制；②脂质代谢示踪——动态监测外源DHA在细胞内的摄取、富集及代谢转化过程，明确不饱和脂肪酸在细胞器膜重塑和脂质微结构构建中的作用；③厚层生物样本膜结构标记——近红外长波长光线穿透性更强，适配多层级生物样本的检测分析，可开展脂质载体分布检测及生物膜深层结构观测；④纳米脂质载体示踪——用于评估含DHA的脂质纳米载体的细胞摄取和体内分布。

Q2：Cy5.5-DHA与Cy5-DHA在应用上有何区别？

答：核心区别在于荧光波长与组织穿透深度。Cy5.5-DHA（Ex/Em~675-680/695-710 nm）发射近红外荧光，组织穿透能力优于Cy5-DHA（Ex/Em~640/664 nm），生物自发荧光背景更低，适合深层组织成像和活体成像研究。Cy5-DHA适用于常规荧光显微镜和流式细胞术。选择取决于实验对成像深度和仪器配置的要求——活体成像和厚层样本分析优先选择Cy5.5版本。

Q3：Cy5.5-DHA的标记原理是什么？

答：Cy5.5-DHA通过NHS酯法制备。DHA分子末端的羧基与含氨基的连接臂在EDC/NHS存在下反应引入伯氨基，然后该氨基再与Cy5.5-NHS酯在弱碱性条件下发生亲核加成反应，形成稳定的酰胺键。反应通常在弱碱性条件下进行，可使用少量有机碱（如三乙胺）作为催化剂，整个反应过程需避光、低温操作以保证Cy5.5荧光稳定性。反应后通过反相高效液相色谱（RP-HPLC）或硅胶柱层析纯化，获得纯化的Cy5.5-DHA偶联物。

Q4：如何验证Cy5.5-DHA的标记成功与活性保持？

答：①质谱（MS）分析——确认偶联产物的分子量与预期一致；②核磁共振（¹H NMR）分析——验证DHA的脂肪酸链结构和Cy5.5的共轭体系完整性；③紫外-可见吸收和荧光光谱——确认Cy5.5的特征吸收峰和荧光发射峰；④细胞膜嵌入实验——将Cy5.5-DHA与细胞共孵育后，通过共聚焦显微镜观察其是否成功嵌入细胞膜并保持膜结构完整性。